ABI_7500熒光定量PCR儀操作方便、運(yùn)行速度快、實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，從不常見(jiàn)設(shè)備變成分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的基礎(chǔ)設(shè)備。隨著PCR技術(shù)的成熟運(yùn)用，多重?cái)U(kuò)增越來(lái)越熱鬧，熒光定量PCR儀也不能幸免。該儀器發(fā)展到如今各個(gè)廠家都推出4通道、5通道甚至6通道熒光定量PCR儀，眼花繚亂的選擇讓人無(wú)所適從，就有人一不小心走進(jìn)了“通道越多越好”的誤區(qū)。
在使用有些廠家5通道的熒光定量?jī)x時(shí)，為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性都要在實(shí)驗(yàn)中使用ROX（一種熒光染料）或?qū)Ｓ玫腞eferencedye，這些熒光染料都必須單獨(dú)使用一個(gè)檢測(cè)通道。這樣以來(lái)，真正能檢測(cè)多重PCR熒光信號(hào)的有效通道只有4個(gè)，而且使用校正染料可能會(huì)增加后期的使用成本。有的熒光定量PCR的檢測(cè)通道是只為自已廠家的專用的熒光染料或試劑開(kāi)放的，有效檢測(cè)通道也絕非像宣傳資料中宣稱的那么多。在購(gòu)買(mǎi)前確認(rèn)熒光定量PCR儀器的有效檢測(cè)通道尤為重要，不能單單只聽(tīng)宣傳。
考慮多重ABI_7500熒光定量PCR儀的通道數(shù)的時(shí)候也應(yīng)該從實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況出發(fā)，多重PCR并非人人適用、人人可用，因?yàn)槎嘀豍CR必須要對(duì)退火溫度進(jìn)行優(yōu)化，在引物設(shè)計(jì)的時(shí)候就可能開(kāi)始考慮能不能放在一個(gè)反應(yīng)體系內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)，不同的反應(yīng)需要的退火溫度不同，不合適的退火溫度會(huì)降低擴(kuò)增效率，放大非特異性擴(kuò)增，甚至擴(kuò)增不出來(lái)，它使實(shí)驗(yàn)指數(shù)倍的復(fù)雜化了。臨床上因?yàn)橛性噭S家專門(mén)針對(duì)某些疾病開(kāi)發(fā)研制的多重檢測(cè)試劑盒，才需要用到3、4、5通道的檢測(cè)；科研用的熒光定量因?yàn)樵O(shè)計(jì)探針麻煩，基本上都用染料法，基本上單通道就能滿足。
