聊一聊ABI_7500熒光定量PCR儀在醫(yī)療方面的應(yīng)用
ABI_7500熒光定量PCR儀,由熒光定量系統(tǒng)和計算機(jī)組成,用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光。與實(shí)時設(shè)備相連的計算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實(shí)時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強(qiáng)度相對于循環(huán)數(shù)的圖表。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實(shí)時設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正常化處理來彌補(bǔ)背景熒光的差異。正常化后可以設(shè)定域值水平,這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。今天,小編為大家來講解一下熒光定量PCR儀在醫(yī)療方面的應(yīng)用。
⑴ 病原體檢測
目前,采用熒光定量PCR檢測技術(shù)可以對淋球菌、沙眼衣原體、解脲支原體、人類乳頭瘤病毒、單純皰疹病毒、人類免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、結(jié)核分枝桿菌、EB病毒和巨細(xì)胞病毒等病原體進(jìn)行定量測定。與傳統(tǒng)的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡便等優(yōu)點(diǎn)。
如:結(jié)核菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在:
a.區(qū)分TB與其它分枝桿菌;
b.檢測TB耐藥基因;
c.提高TB的陽性檢出率。
?、?產(chǎn)前診斷
到目前為止,人們對遺傳性物質(zhì)改變引起的遺傳性疾病還無法治療,ABI_7500熒光定量PCR儀只能通過產(chǎn)前監(jiān)測,減少病嬰出生,以防止各類遺傳性疾病的發(fā)生,如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生,從孕婦的外周血中分離胎兒DNA,用實(shí)時熒光定量PCR檢測其Y性別決定區(qū)基因是一種無創(chuàng)傷性的方法,易為孕婦所接受。
?、?藥物療效考核
對乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV) 定量分析顯示:病毒量與某些藥物的療效關(guān)系。HCV高水平表達(dá),干擾素治療作用不敏感,而HCV低滴度,干擾素作用敏感;在拉米夫定治療過程中,HBV-DNA的血清含量曾有下降,隨后若再度上升或超出以前水平,則提示病毒發(fā)生變異。如PCR技術(shù)在HBV檢測中的應(yīng)用及意義:
a.了解乙肝病毒在體內(nèi)存在的數(shù)量。
b.是否復(fù)制。
c.是否傳染,傳染性有多強(qiáng)。
d.是否有必要服藥。
e.肝功能異常改變是否由病毒引起。
f.判斷病人是適合用哪類抗病du藥物。
g.判斷藥物治療的療效。
?、?腫瘤基因檢測
盡管腫瘤發(fā)病的機(jī)理尚未清楚,但相關(guān)基因發(fā)生突變是致癌性轉(zhuǎn)變的根本原因已被廣泛接受。癌基因的表達(dá)增加和突變,在許多腫瘤早期就可以出現(xiàn)。實(shí)時熒光定量PCR不但能有效地檢測到基因的突變,而且可以準(zhǔn)確檢測癌基因的表達(dá)量。目前用此方法進(jìn)行過端粒酶hTERT基因、慢性粒細(xì)胞性白血病WT1基因、腫瘤ER基因、前列腺癌PSM基因、腫瘤相關(guān)的病毒基因等多種基因的表達(dá)檢測。ABI_7500熒光定量PCR儀隨著與腫瘤相關(guān)的新基因的不斷發(fā)現(xiàn),熒光定量PCR技術(shù)將會在腫瘤的研究中發(fā)揮更大的作用。